По клиническим проявлениям. От появления у суки первых коровянистых выделений искусственное осеменение проводят на 11 — 14 день двукратно с интервалом 48 часов, с учетом феномена охоты (на 3—4 день от начала охоты). Также учитывают отёк вульвы — примерно, через четыре дня от начала уменьшения отёка.
Цитологическое исследование влагалищного мазка. Мазок берут с верхнего свода влагалища, окрашивается любым известным способом. Случка проводится в момент, когда более 60% эпителиальных клеток являются безъядерными и в мазке отсутствуют полиморфно-ядерные лейкоциты.
Эндоскопическое исследование. Искусственное осеменение проводят в период, когда уменьшается отёчность продольных складок влагалища, количество вторичных складок уменьшается и они становятся бледными.
Измерение уровня гормонов. Определяют с помощью ИФА. Искусственное осеменение проводят между 4-м и 6-м днём, после того как концентрация прогестерона в плазме превысит 2 нг/мл.
10. МЕТОДЫ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ
Влагалищное осеменение
Инструменты: пластиковый шприц с полужёстким катетером, длиной до 30 см.
Сперму набирают на всю длину катетера (в цилиндр набирать нельзя из-за небольшого объёма спермы, но в нём должен быть достаточные объём воздуха для проталкивания дозы спермы из катетера во влагалище).
После санитарной обработки наружных половых органов катетер вводят во влагалище, при возможности проводят пальпацию катетера и шейки матки через брюшную стенку. Суку приподнимают за задние конечности и опустошают катетер, прогоняя через катетер воздух из шприца.
Рекомендуется проводить пальпаторную стимуляцию клитора в течение 1 -2 минут, так как это вызывает антиперистальтические сокращения влагалища и матки, засасывающие сперму в матку.
Внутриматочное осеменение
Ввести обычный катетер через шейку матки трудно и не всегда возможно, так как влагалище очень узкое (0,8—2 см в диаметре) и длинное (до 20 см), шейка имеет выпячивающуюся влагалищную часть, из-за чего образуются слепые карманы. Поэтому применяют специальные методики и специальные инструменты.
Осеменение катетером Фоли
Классический катетер Фоли имеет на конце рабочей (влагалищной части) баллончик из тонкостенной резины, который при заполнении воздухом раздувается и не дает сперме вытечь из краниальной части влагалища. Баллончик имеет отверстие для второго обычного катетера, который продвигают ближе к шейке матки, изливая на шейку матки сперму. После введения спермы второй катетер втягивают в катетер Фоли, тем самым предотвращая утечку спермы вокруг отверстий катетера. Оба катетера оставляют во влагалище самки на 15 минут.
Осеменение при помощи норвежского катетера (Д. Фогнер)
Норвежский катетер состоит из наружного пластикового катетера и внутреннего — металлического с расширенным и закругленным концом.
Наружный пластиковый катетер вставляется во влагалище суки на уровне шейки матки. Шейку матки пальпируют через брюшную стенку и оттягивают краниально, чтобы сгладить влагалищную часть шейки матки и, внутренний катетер можно было бы ввести через цервикальный канал.
Методика требует большой практики.
Осеменение при помощи эндоскопа
Необходим жесткий эндоскоп с выдвигающимся катетером. Эндоскоп продвигают до шейки матки, отыскивают отверстие шейки матки и вставляют катетер.
Хирургическая методика
Под общим наркозом производится лапаротомия по средней линии живота, тело матки выводят в разрез. С помощью иглы вводят в тело матки внутривенный катетер и сперму через него медленно вводят в матку.
11. МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ БЕРЕМЕННОСТИ
Клинико-гинекологическое исследование
Примерно через месяц после осеменения при у беременных сук наблюдаются слизистые выделения в небольшом количестве из вульвы.
При пальпации, через месяц после оплодотворения в брюшной полости прощупываются плотные образования, представляющие собой сферические очертания, диаметром 10—20 см.
С 35 дня наблюдается увеличение массы животного, увеличение молочных желёз и сосков, из молочных желез выделяется серозная жидкость, которая оставляет вокруг сосков тёмные, легкосмываемые пятна С 40-го дня заметно увеличение объёма живота. За неделю до родов наблюдаются предвестники родов (животное строит «гнездо», из сосков появляется молозиво, расслабляются связки таза, расслабляется шейка матки, «опускается» живот и др.).
За неделю до родов при осмотре и пальпации брюшной стенки наблюдается движение плодов.
В последних половине и трети беременности при аускультации или с помощью электрокардиографа можно регистрировать сердцебиение плодов. Частота сердечных сокращений обычно вдвое выше, чем у матери.
Рентгенография
Точная диагностика беременности возможна только с 45-го дня, когда начинается окостеневание скелета. На рентгенограмме просматриваются кости плодов. На поздней стадии беременности можно точно подсчитать количество плодов.
Ультразвуковой контроль беременности и бесплодия
Определить результативность искусственного осеменения, дифференциировать беременность от ее ложного проявления и от воспаления матки на сегодняшний день наиболее доступно с помощью ультразвукового исследования.
БЕРЕМЕННОСТЬ. С 15-го дня беременности (в эмбриональную стадию) амниотические полости выявляются как разрозненные округлые эхонегативные структуры, диаметром 1—1,5 см. На 21 день зародыши выявляются в виде эхонегативных сферических образований, диаметром 10—15 мм, с 32 дня определяется голова, туловище, зачатки конечностей. Скелет позвоночника идентифицируется с 40-го дня. С 45-го дня определяются органы плода.
К 50—58 дню беременности количество жидкости в матке резко уменьшается и наличие плодов данным прибором можно установить только по четкообразному строению позвоночника.
Точное количество плодов с помощью ультразвукового исследования из-за артефакта многократного отражения ультразвуковой волны (акустическое зеркало) выявить не удается.
При патологии беременности, возможно диагностировать замедление частоты сердечных сокращений и снижение двигательной активности плода.
При гибели и гнилостном разложении (эмфиземе) плодов в матке определяется газ от жизнедеятельности микроорганизмов, который на сканограммах создает эхогенные зоны с тенями, затрудняющие исследование, так как через газовые среды ультразвуковые волны не проходят.
БЕСПЛОДИЕ. При бесплодии матка и яичники часто не выявляются. Выявить удается рога матки во время течки, так как в полостях рогов имеется ограниченное количество слизи.
Любой воспалительный процесс сопровождается увеличением диаметра рогов матки и заполнение полости воспалительным экссудатом (анэхогенная или гипоэхогенная структура).
При эндометрите выявляется лишь увеличение диаметра матки и незначительный экссудат в полости матки.
Рис. 2. Ультразвуковая картина при пиометре
При пиометре диаметр рогов значительно увеличен, стенки матки неоднородные, повышенной эхогенности; при железисто-кистозной гиперплазии возможна визуализация кист.
Рис. 3. Ультразвуковая картина при беременности
При гидрометре стенки матки часто истончены, поэтому при поперечном разрезе ультразвуковым сканером, имеют не округлую форму, а форму неправильных пчелиных сот.
При пиометре, гидрометре, железисто-кистозной гиперплазии и других аналогичных заболеваниях, сопровождающихся скоплением в полости матки значительного количества патологического экссудата на сканограмме, в поле зрения могут попадать несколько ультразвуковых срезов одного и того же рога матки, так последний может перегибаться несколько раз.
12. САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА ПРИ ИСКУССТВЕННОМ ОСЕМЕНЕНИИ
При проведении искусственного осеменения сук необходимо строго придерживаться ветеринарно-санитарных правил, установленных ветеринарным законодательством, как и при искусственном осеменении самок других животных.
За 4—5 часов до работы проводят генеральную уборку помещения с помощью не пахнущих дезсредств, облучают бактерицидными лампами.
Наружные половые органы животного тщательно обмывают тёплой водой с мылом, орошают тёплым раствором фурацилина (1:5000), после чего насухо вытирают ватным тампоном.
Перед операцией искусственного осеменения необходимо тщательно мыть руки с мылом, спиртом при помощи щётки, а затем обрабатывать их 70%-ным спиртом, ссадины, подногтевые пространства, сгибы суставов пальцев смазывать 5%-ным йодом, затем одевать одноразовые стерильные перчатки.