Нудер (1950) в своих исследованиях установил, что объем эякулята колеблется от 1 до 20 мл. Он считает, что хорошая сперма должна иметь в 1 мл от 88 до 588 млн. сперматозоидов.
Из большинства этих исследовательских работ видно, что хороший образец семени не должен содержать более 20 % патологических сперматозоидов.
Харроп (1954), получая при помощи искусственной вагины сперму кобелей (различных пород), пришел к заключению, что средний объем эякулята составляет 9,5 мл, причем более мелкие породы в большинстве случаев дают меньшее количество спермы, чем более крупные. Он детально изучил те фракции (части) спермы, о которых говорилось ранее. Это было сделано установлением чистой градуированной пробирки в искусственную вагину после того, как каждый раз была получена жидкость (рис. 118).
Рис. 118. Сперма кобеля в трех фракциях
1 — первая фракция; 2 — вторая фракция; 3 — третья фракция
Первая фракция, объем которой варьировал от 0,25 до 2 мл, состояла из чистой водянистой жидкости и содержала немного (или совсем не содержала) сперматозоидов. Это, вероятно, секрет желез слизистой оболочки уретрального канала.
Вторая часть почти белого цвета и гораздо более вязкой консистенции имела объем от 0,5 до 3,5 мл и содержала сперматозоиды.
Третья часть, состоящая из выделений предстательной железы, была тоже прозрачной по внешнему виду и водянистой по консистенции. Объем этой фракции колеблется от 3 до 20 мл соответственно породе и величине собак, причем и эта фракция может значительно варьировать у одного и того же самца при различных случаях. Сперматозоидов она содержит очень мало (или совсем не содержит).
Оценка спермы. Тотчас же после получения пробирку со спермой помещают в теплую воду с температурой 35° с тем, чтобы сперма могла постепенно охлаждаться и не подвергаться температурному шоку.
Зрительное исследование. В зависимости от густоты цвет всей выделенной спермы кобеля может изменяться от водянисто-серого до молочно-белого. При отстаивании сперма постепенно разделяется на два слоя, спермовые клетки оседают на дно, а сверху находится полупрозрачная жидкость.
Микроскопическое исследование подвижности сперматозоидов. Исследование на подвижность должно быть произведено немедленно после сбора. Каплю спермы при помощи стеклянной палочки наносят на теплое предметное стекло. Нормальная сперма обладает огромной активностью, вся масса совершает как бы волнистые движения. Индивидуальные движения сперматозоидов являются интенсивными в свежей сперме, и лучше всего ее изучать под микроскопом при затемненном поле зрения.
Густота. Зрительные исследования густоты дают вполне надежные сведения в отношении качества спермы, но точные данные о густоте могут быть сделаны только на основе определения концентрации спермы на единицу объема. Техника подсчета сперматозоидов такая же, какую обычно применяют для подсчета сперматозоидов сельскохозяйственных животных, при помощи счетной камеры для форменных элементов крови.
При массовом исследовании спермы кобелей цифра концентрации сперматозоидов равна 125 млн. в 1 мл. Эта цифра может значительно варьировать у кобелей разных пород, отдельных собак и у каждого самца в различных случаях. Концентрация сперматозоидов может варьировать от 4 до 540 млн. в 1 мл.
Оценка жизнеспособности сперматозоидов методом окрашивания. Из всех испытанных методов окраски лучшим оказался эозиннигрозиновый. Он состоит в том, что на нагретое предметное стекло помещают капельку спермы, смешанную с двумя каплями 5 % раствора эозина. После тщательного смешивания в течение нескольких секунд стеклянной палочкой добавляют четыре капли 10 % раствора нигрозина и опять смешивают. Из полученной смеси делают на другом предметном стекле мазок и фиксируют над пламенем спиртовки.
При микроскопическом исследовании сперматозоиды ясно выделяются на коричневом поле, причем живые сперматозоиды остаются неокрашенными, в то время как мертвые принимают розовый цвет эозина.
Морфология. Хорошим методом для морфологических исследований является смешивание капли спермы с каплей туши. Патология сперматозоидов хорошо констатируется. Метод окрашивания эозиннигрозином может быть также использован и для изучения морфологии сперматозоидов, применяя ту же технику, как и с тушью. Число сперматозоидов, показывающих морфологические, атипичные признаки, регистрируется, как процент ненормальных сперматозоидов.
рH нормальной собачей спермы колеблется от 5,8 до 6,9, если определять сразу же после ее сбора. Если сперму сохранять, то она становится более кислой. Средняя цифра рН собачей спермы, получаемая от трех исследований, составляет 6,75. Породных различий не отмечается. Если каждую из трех фракций спермы исследовать раздельно, то средние цифры рН будут следующими:
1-я фракция — 6,37
2-я фракция — 6,10
3-я фракция — 7,20
Влияние частоты эякуляции на количество спермы. Ввиду противоречивых взглядов по данному вопросу Хорропом (1954) были проведены опыты, чтобы определить: имеет ли частота эякуляции какое-либо вредное влияние на количество и качество спермы. Были подобраны собаки (кобели) 3–5-летнего возраста, дающие объем эякулята в среднем около 12 мл с густотой в 1 мл 180–200 млн. сперматозоидов и подвижностью 4 балла (из расчета по 5 балльной системе).
Сперму от собак получали ежедневно на протяжении 18 дней. Никаких добавлений в прежней диете собаки не получали. В конце опытов собаки были здоровы и не проявляли болезненных явлений от ежедневных эякуляций.
Результаты влияния частоты получения спермы на объем эякулята изображены в графике № 1 (рис. 119).
Рис. 119. Влияние частоты получения спермы ни объем эякулята
Влияние частоты получения спермы от собак на густоту спермы изображено в графике № 2 (рис. 120).
Рис. 120. Влияние частоты получения спермы на густоту спермы
Влияние частоты получения спермы от кобелей на подвижность изображено в графике № 3 (рис. 121).
Рис. 121. Влияние частоты получения спермы на подвижность сперматозоидов
Через 5 дней после окончания опытов сперма вновь была получена, результаты исследования которой были следующими:
объем — 11,5
подвижность — 4
густота — 115 млн. в 1 мл.
Известна и скорость выделении спермы у самцов разных пород. Она зависит не только от породности, по и от индивидуальных особенностей собаки. Разница в скорости выделения как у о дольных пород, так и индивидуумов наблюдается в основном в третьей фракции.
Время выделения первой фракции 30–50 секунд. У нормального самца вслед за первой фракцией следует вторая и продолжается 50–80 секунд. Третья фракция следует за второй и продолжается от 3 до 30 минут.
Первая фракция является в основном смазочным материалом.
Вторая фракция содержит половые клетки кобеля.
Третья фракция — секреция предстательной железы является посредником, в котором сперматотозоиды продвигаются до участка оплодотворения.
При исследовании третьей фракции намечена разница в pH в различных случаях. Щелочность третьей фракции, по-видимому, активирует более кислые спермопосители второй фракции. Если каплю второй фракции поместить на теплое предметное стекло и зучить под микроскопом, то можно наблюдать вполне хорошую степень подвижности. Но эта подвижность значительно увеличивается, если к изучаемой сперме добавить каплю третьей.
У нормального самца густота спермы очевидно будет варьировать с объемом в зависимости от количества простатической жидкости, которая содержится в выделении. Это и объясняет большие объемные вариации, полученные у исследователей многие из которых всю простатическую жидкость не собирали и изучали более высокую густоту.
Скорость выделения спермы у кобелей доказывает некоторые интересные предположения. Согласно цифрам, полученным в течение этих исследований, собаки выделяют свои первые и вторые фракции в течение 70 секунд и удивляешься, как много сильных, но неопытных самцов были признаны негодными, как стерильные, потому что они выделяли фракции первую и вторую при их первом половом возбуждении до спаривания с сукой. Здесь следует отметить, что не каждый самец будет реагировать самопроизвольно на сбор спермы независимо от метода применения. Некоторые самцы, имеющие нервный нрав, требуют время для того, чтобы они могли успокоиться и привыкнуть к окружающей обстановке до того, как они будут выделять сперму. Поэтому неразумно признавать кобеля неполноценным в половой активности, если он отказывается выделять сперму при первой потребности. Даже если самец реагирует немедленно, из этого не всегда следует, что первые выделения являются характерным образцом качественных показателей его спермы.
